在使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí),可以通過(guò)以下方法來(lái)避免誤差:
一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段
儀器校準(zhǔn)
細(xì)胞懸液制備
二、加樣過(guò)程
準(zhǔn)確加樣
使用合適量程的移液器吸取細(xì)胞懸液,確保加樣量準(zhǔn)確。加樣量過(guò)多可能導(dǎo)致細(xì)胞重疊,難以準(zhǔn)確計(jì)數(shù);加樣量過(guò)少則可能使計(jì)數(shù)結(jié)果不準(zhǔn)確。
小心地將細(xì)胞懸液滴加在計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)區(qū)域上,避免產(chǎn)生氣泡。氣泡會(huì)影響細(xì)胞的分布和觀察,導(dǎo)致計(jì)數(shù)錯(cuò)誤。
三、計(jì)數(shù)過(guò)程
選擇合適的計(jì)數(shù)區(qū)域
通常選擇計(jì)數(shù)板上的多個(gè)區(qū)域進(jìn)行計(jì)數(shù),然后取平均值,以提高計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。避免只計(jì)數(shù)一個(gè)區(qū)域而產(chǎn)生偶然誤差。
優(yōu)先選擇細(xì)胞分布均勻的區(qū)域進(jìn)行計(jì)數(shù),避開(kāi)邊緣區(qū)域和細(xì)胞過(guò)于密集或稀疏的區(qū)域。
規(guī)范計(jì)數(shù)方法
只計(jì)數(shù)完整的細(xì)胞,對(duì)于破碎的細(xì)胞、細(xì)胞碎片和雜質(zhì)應(yīng)不予計(jì)數(shù)。
對(duì)于壓線的細(xì)胞,只計(jì)數(shù)上側(cè)和左側(cè)線的細(xì)胞,這樣可以避免重復(fù)計(jì)數(shù)。遵循統(tǒng)一的計(jì)數(shù)規(guī)則,確保不同人員計(jì)數(shù)時(shí)的一致性。
計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)集中注意力,避免漏計(jì)或重復(fù)計(jì)數(shù)??刹捎弥鸩揭苿?dòng)視野的方法,確保每個(gè)細(xì)胞都被觀察到。
四、數(shù)據(jù)處理階段
多次計(jì)數(shù)
數(shù)據(jù)分析